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  • 几丁质酶活性检测试剂盒 微量法
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产品名称：

几丁质酶活性检测试剂盒 微量法
产品品牌： SOLARBIO/索莱宝 价格：
厂商性质： 生产厂家 产品时间： 2024-04-14
储存条件
2-8℃
中文名称
几丁质酶活性检测试剂盒 微量法
有效期
6个月
单位
盒
英文名称
Chitinase Activity Assay Kit
别名
几丁质酶测定试剂盒 几丁质酶测定测试
检测方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
规格
100T/48S
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产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝CAS详询
分子式详询纯度详询
分子量详询货号BC0825
规格100T/48S供货周期现货
主要用途测定意义：几丁质主要存在于虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官(例如乌应用领域环保,化工,生物产业,农业,综合

几丁质酶活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0825
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件
提取液液体60 mL×1瓶2-8℃保存
试剂一液体8mL×1瓶2-8℃保存
试剂二液体9 mL×1瓶2-8℃保存
试剂三液体3mL×1瓶2-8℃保存
试剂四A粉剂×2瓶2-8℃保存
试剂四B液体50mL×1瓶2-8℃保存
标准品粉剂×1支2-8℃保存
溶液的配制：

  1. 试剂二：此试剂为悬浊液，使用前需摇匀；

  2. 试剂三：此试剂为饱和溶液，低温（2-8℃）条件取出会有晶体析出，60℃加热使其溶解即可；

  3. 试剂四：临用前取一瓶试剂四A，加入21mL试剂四B中，充分溶解，现用现配。用不完的试剂2-8℃可以保存4周（试剂四B若有结晶可37℃促进溶解）；

  4. 标准品：5mg N-乙酰氨基葡萄糖。临用前加入 1mL 试剂一配制成 5mg/mL 的标准溶液，即5000μg/mL的标准溶液，2-8℃可以保存4 周。

产品说明：
几丁质酶主要存在于虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官（例如乌贼的软骨），以及真菌类的细胞壁中。而几丁质酶（EC 3.2.1.14）可催化几丁质水解，具有抵御真菌侵染的作用，成为抗真菌病害的研究热点。
几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖，N-乙酰氨基葡萄糖与碱共热产生的中间化合物可进一步与对二甲氨 基 苯甲醛反应产生显色物质，该显色物质在585nm处有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性。



注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液枪、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。


操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件

注意事项：

  1. 反应结束后尽快进行比色。

  2. 吸光值大于1.5或者ΔA大于1时，样本用提取液适当稀释再测定或者缩短37℃酶促反应时间，注意同步修改计算公式。若ΔA小于0.01时，可以延长第一步37℃反应时间或者加大样本的加入量，注意修改计算公式。

实验实例：

  1. 取0.111g虾壳加入1mL提取液进行匀浆研磨，取上清后按照测定步骤操作，用96孔板测定吸光度并计算ΔA=A测定-A对照=0.531-0.054=0.477，带入标曲y=0.007x+0.0205，得出x=65.214μg/mL，按样本质量计算酶活得：

几丁质酶活性（U/g 质量）=2.5×x÷W=1468.790U/g 质量。

  1. 取0.113g平菇加入1mL提取液进行匀浆研磨，取上清后按照测定步骤操作，用96孔板测定吸光度并计算ΔA=A测定-A对照=0.754-0.055=0.699，带入标曲y=0.007x+0.0205，得出x=96.929 μg/mL，按样本质量计算酶活得：

几丁质酶活性（U/g 质量）=2.5×x÷W=2144.437 U/g 质量。
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