葡萄糖含量检测试剂盒 微量法

葡萄糖含量检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC2505
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂一：2μmol/mL葡萄糖溶液；

2. 混合试剂的配制：使用前将试剂二和试剂三1：1等体积混合，用多少配多少。

产品说明：
葡萄糖不仅是细胞能量代谢的主要底物，而且其代谢中间产物是生物合成的重要底物。植物可通过光合作用产生葡萄糖。就哺乳动物而言，葡萄糖不仅是大脑神经系统、肌肉、脂肪组织等的能源，而且与还原性辅酶、乳糖和乳脂的合成密切相关。
葡萄糖氧化酶（Glucose Oxidase，GOD）催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生过氧化氢；过氧化物酶（Peroxidase，POD）催化过氧化氢氧化4-氨基安比林偶联酚，生成有色化合物，在505 nm 有特征吸收峰。
技术指标：
低检出限：0.02 μmol/mL
线性范围：0.03-5 μmol/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、超声破碎仪、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项：
若（A测定-A空白）小于0.005，建议加大提取样本质量（或细胞数量）或者样本上清液的加入量；（A测定-A空白）大于1.2，将上清液用蒸馏水稀释即可。计算公式中注意乘以稀释倍数。
实验实例：

1. 
   

1. 
   

2. 取0.1g小鼠肝脏加入1mL蒸馏水进行前处理步骤，离心取上清后按测定步骤测定，用96孔板测得吸光值ΔA测定=A测定-A空白=0.856-0.051=0.805，ΔA标准=A标准-A空白=0.724-0.051=0.673。按样本质量计算葡萄糖含量（μmol/g 质量）= 2×ΔA测定÷ΔA标准÷W=2×0.805÷0.673÷0.1= 23.923 μmol/g 质量

3. 
   

2. 
   

1. 
   

2. 取0.1g绿萝叶片加入1mL蒸馏水进行前处理步骤，离心取上清后按测定步骤测定，用96孔板测得吸光值ΔA测定=A测定-A空白=0.318-0.051=0.267，ΔA标准=A标准-A空白=0.724-0.051=0.673。按样本质量计算葡萄糖含量（μmol/g 质量）= 2×ΔA测定÷ΔA标准÷W=2×0.267÷0.673÷0.1=7.935 μmol/g 质量

3. 
   

3. 
   

1. 
   

2. 取5百万Jurkat细胞样本加入1mL蒸馏水进行前处理步骤，离心取上清后按测定步骤测定，用96孔板测得吸光值ΔA测定=A测定-A空白=0.057-0.051=0.007，ΔA标准=A标准-A空白=0.724-0.051=0.673。按细胞数量计算葡萄糖含量（μmol/10⁶ cell)  =0.4×ΔA测定÷ΔA标准=0.4×0.007÷0.673=4.16×10^-3 μmol/10⁶ cell

3. 
   

相关发表文献：
[1] Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou, et al. Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion. Cell Death and Disease. March 2019; (IF5.959)
[2] Jing Li,Yabing Duan,Chuanhong Bian,et al. Effects of validamycin in controlling Fusarium head blight caused by Fusarium graminearum: Inhibition of DON biosynthesis and induction of host resistance. Pesticide Biochemistry and Physiology. January 2019; 153:152-160. (IF2.87)
参考文献：
[1] Basagni U, Bonicolini F. Ready to use liquid reagent for determining the glucose content in blood: U.S. Patent 5,077,199[P]. 1991-12-31.
[2] Kabasakalian P, Kalliney S, Westcott A. Enzymatic blood glucose determination by colorimetry of N, N-diethylaniline-4-aminoantipyrine[J]. Clinical chemistry, 1974, 20(5): 606-607.
相关系列产品：
BC0340/BC0345 糖原含量检测试剂盒
BC2540/BC2545 纤维素酶（CL）活性检测试剂盒
BC0330/BC0335 海藻糖含量检测试剂盒
BC2490/BC2495 血糖含量检测试剂盒

葡萄糖含量检测试剂盒 微量法 葡萄糖含量检测试剂盒 微量法