山*醇含量检测试剂盒 微量法

山*醇含量检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC2525
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：
1、标准品：临用前将标准品用1mL蒸馏水溶解，配制成浓度为10 mg/mL的标准液待用，2-8℃可保存2周。
产品说明：
山*醇广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，不仅是糖运输形式之一，而且与生物抗逆性和食物风味密切相关。因此，在糖代谢、抗逆性和食品研究中经常需要检测山*醇含量变化。
山*醇在碱性溶液中与铜离子形成蓝色络合物，在655nm波长有特征吸收峰。
技术指标：
低检出限：0.0583 mg/mL
线性范围：0.125-4 mg/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
称取约0.1g样本，加入1mL蒸馏水研磨成匀浆，置沸水浴中煮沸10分钟（盖紧，以防止水分散失），冷却至室温后，8000g，常温离心10min，取上清液待测。
二、测定步骤

1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至655nm，分光光度计用蒸馏水调零。

2. 标准溶液的制备：临用前将10mg/mL标准液用蒸馏水稀释至4、2、1、0.5、0.25、0.125、0（空白管）mg/mL标准溶液待测。

3. 标准液稀释可参考下表。

备注：实验中每个标准管需230µL标准溶液。

1. 样本测定（在1.5mL EP管中依次加入下列试剂）：

注意事项：
如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。计算公式中注意乘以稀释倍数。
参考文献：
Salvucci M E, Stecher D S, Henneberry T J. Heat shock proteins in whiteflies, an insect that accumulates sorbitol in response to heat stress[J]. Journal of Thermal Biology, 2000, 25(5): 363-371.
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