品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | CAS | 详询 |
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分子式 | 详询 | 纯度 | 详询 |
分子量 | 详询 | 货号 | BC3995 |
规格 | 100T/48S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)活性检测 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,综合 |
土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)活性检测试剂盒说明书
微量法
货号:BC3995
规格:100T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体2mL×1 瓶(自备) | 2-8℃保存 |
试剂二 | 液体12mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 | 粉剂×2瓶 | -20℃保存 |
试剂四 | 液体30mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
标准品 | 液体1mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
试剂一:甲苯自备;
试剂三:临用前取1瓶加入5mL蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂-20℃分装保存一周,避免反复冻融;
标准品:5mmol/L的对硝基 苯*溶液。临用前用试剂二将标准品稀释50倍得100μmol/L的标准溶液。(具体稀释过程见操作步骤)
产品说明:
土壤芳基硫酸酯酶来自于土壤微生物,能酶促土壤有机硫化物转化为植物可吸收的无机态硫,在硫素的生物化学循环和植物的硫营养代谢中具有重要的作用,是反映土壤质量的一个重要生物学指标。
ASF能够催化对-硝基 苯硫酸钾生成对-硝基 苯*,后者在410nm有特征光吸收。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、恒温水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、研钵、冰、30-50目筛、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料"附件
三、S-ASF活力计算
单位的定义:每天每g土样中产生1μmol对-硝基 苯*定义为一个酶活力单位。
S-ASF活力(U/g 土样)=ΔA测定÷ (ΔA标准÷C标准)×V反总÷W÷T =0.456×ΔA测定÷ΔA标准÷W
T:反应时间,1h=1/24d;V反总:反应体系总体积:1.9×10-4L;C标准:标准溶液浓度,100μmol/L;W:样本质量,g。
实验实例:
分别称取两管0.02g三叶草土样,分别记为测定管和对照管,按照测定步骤操作,用96孔板测得计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.401-0.076=0.325,ΔA标准=A标准管-A空白管=0.395-0.047=0.348,计算酶活得:
S-ASF活力(U/g 土样)=0.456×ΔA测定÷ΔA标准÷W=0.456× 0.325÷0.348÷0.02=21.293 U/g 土样。
分别称取两管0.02g土样,分别记为测定管和对照管,按照测定步骤操作,用96孔板测得计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.262-0.066=0.196,ΔA标准=A标准管-A空白管=0.395-0.047=0.348,计算酶活得:
S-ASF活力(U/g 土样)=0.456×ΔA测定÷ΔA标准÷W=0.456× 0.196÷0.348÷0.02=12.841 U/g 土样。
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