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  • 总糖含量检测试剂盒 微量法
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产品名称:

总糖含量检测试剂盒 微量法

产品品牌: SOLARBIO/索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2024-04-11
储存条件
2-8℃
中文名称
总糖含量检测试剂盒 微量法
有效期
6个月
单位

英文名称
Total Carbohydrate Content Assay Kit
别名
总糖含量测定试剂盒 总糖含量测试盒
检测方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
规格
100T/96S

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝CAS详询
分子式详询纯度详询
分子量详询货号BC2715
规格100T/96S供货周期现货
主要用途测定意义:理想的补钙制剂。因而,GCDH已成为制备高含量低聚果糖的理想用酶。应用领域环保,化工,生物产业,农业,综合


总糖含量检测试剂盒说明书
微量法
货号:BC2715
规格:100T/96S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件
试剂一液体100 mL×1瓶2-8℃保存
试剂二液体100 mL×1瓶2-8℃保存
试剂三液体5 mL×1瓶2-8℃保存
标准品粉剂×12-8℃保存
溶液的配制:
  1. 标准品:10 mg无水*萄糖。临用前加1 mL蒸馏水溶解为10 mg/mL的葡萄糖标准品备用,2-8℃保存两周。

产品说明:
糖类物质是构成植物体的重要成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。总糖主要指具有还原性的葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖,麦芽糖以及可能部分水解的淀粉。
总糖酸水解为还原糖,还原糖在碱性条件下与DNS试剂共热后被还原成氨基化合物,在碱性溶液中呈红棕色,还原糖的量与桔红色物质颜色的深浅成正比关系,以此测定样本中的总糖含量。
技术指标:
低检出限:0.0667 mg/mL
线性范围:0.09-1.8 mg/mL
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料"附件
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
1、组织样本的处理:称取约0.1g样本于10mL EP管中,加入1mL 试剂一,1.5mL蒸馏水,研磨匀浆,沸水浴30min,加入1mL试剂二,涡旋混匀,用蒸馏水定容至10mL8000g25℃离心10min,取上清液待测。(注意稀释,见注意事项)
2、血清(浆)、液体样本的处理:取0.1mL血清(浆)于1mLEP管中,加入0.1mL 试剂一,0.15mL蒸馏水,匀浆,沸水浴30min,加入0.1mL试剂二,涡旋混匀,用蒸馏水定容至1mL8000g25℃离心10min,取上清液待测。(注意稀释,见注意事项)

二、测定步骤
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至540nm,分光光度计用蒸馏水调零。
  1. 标准品准备:将标准品用蒸馏水稀释至1.6、1.00.80.40.20.1mg/mL,标准液稀释可参考下表:

序号稀释前浓度(mg/mL)标准液体积(µL)蒸馏水体积(µL)稀释后浓度(mg/mL)
110321681.6
2101009001
31160400.8
40.81001000.4
50.41001000.2
60.21001000.1
备注:实验中每个标准管需30µL标准溶液。
3、加样表:
试剂(μL空白管测定管标准管
蒸馏水30--
样本-30-
标准品--30
试剂三303030
涡旋混匀,沸水浴10min(盖紧,以防止水分散失),冷却至室温
蒸馏水180180180
涡旋混匀,取出200μL在540nm下测定吸光值,分别记为A空白管、A测定管、A标准管。计算ΔA测定=A测定管-A空白管、ΔA标准=A标准管-A空白管。标准曲线和空白管只需测1-2次。

注意事项:
1、如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。注意同步修改计算公式。
2、此试剂盒对于纤维素的分解程度无法达到100%
实验实例:
  1. 取0.1g兔子肝脏进行样本处理,取上清,按照测定步骤操作,用96孔板测得计算ΔA测定=A测定管-A空白管=0.599-0.05=0.549标准曲线y=0.8881x-0.0561,则x=0.6813按样本质量计算含量得:

总糖含量(mg/g 质量)=10×x÷W=68.13 mg/g 质量。
  1. 取0.1g迎春进行样本处理,取上清,按照测定步骤操作,用96孔板测得计算ΔA测定=A测定管-A空白管=0.594-0.05=0.544标准曲线y=0.8881x-0.0561,则x=0.6575按样本质量计算含量得:

总糖含量(mg/g 质量)=10×x÷W=65.75 mg/g 质量。
  1. 取小鼠血清进行处理,取上清,按照测定步骤操作,用96孔板测得计算ΔA测定=A测定管-A空白管=0.294-0.05=0.244标准曲线y=0.8881x-0.0561,则x=0.338按血清体积计算含量得:

总糖含量(mg/mL)=10×x=3.38 mg/mL
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