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  • Na+k+ ——ATP酶活性检测试剂盒 微量法
产品名称:

Na+k+ ——ATP酶活性检测试剂盒 微量法

产品品牌: 索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-03
Na+k+ ——ATP酶活性检测试剂盒 微量法
测定意义:Na+K+- ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP水解生成ADP和无机磷。

测定原理:Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷,通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC0065
规格100管/48样供货周期现货
主要用途Na+K+- ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP水解生成应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

Na+k+ ——ATP酶活性检测试剂盒 微量法

产品名称:

产品英文名Micro Na+K+——ATPase Assay Kit

产品货号:BC0065               产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格:100管/48样                      产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存;            参考价格:360
库存状态:现货                          
关键字:ATP酶活性检测试剂盒|ATP检测试剂盒|Na+k+ ——ATP检测试剂盒|试剂盒

简要介绍:
Na+K+- ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP水解生成ADP和无机磷。
     Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷,通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性。


产品详细描述
产品内容
试剂一:液体 60mL×1 瓶,4保存。
试剂二:液体4mL×1瓶,4保存。
试剂三:粉剂×2支,-20℃保存。临用前用1mL蒸馏水溶解,现用现配。用不完的试剂-20℃可保存一周。
试剂四:液体 2mL×1 瓶,4保存。
试剂五:粉剂×1瓶,4保存。用时加入3mL双蒸水, 4保存。
试剂六:粉剂×1, 4保存。用时加入5mL双蒸水,溶解后4保存一周。
试剂七:粉剂×1, 4保存。用时加入5mL双蒸水,溶解后4保存一周。
试剂八:液体5mL×1 瓶,室温保存。
标准品:10μmol/mL 标准磷贮备液1mL×14保存。
0.5μmol/mL 标准磷应用液配制:将标准品20倍稀释,即取 0.1mL标准品加1.9mL蒸馏水充分混匀。
定磷剂的配制:H2O:试剂六:试剂七:试剂八=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷剂应为浅黄色。若无色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂现用现配。
注意:配试剂用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
产品说明
Na+K+- ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP水解生成ADP和无机磷。
Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷,通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样品酶液的制备:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
    细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每500万细菌或细胞加入1mL试剂一,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。
    组织:称取约0.1g组织,加入1mL试剂一进行冰浴匀浆。8000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
二、测定步骤
1、分光光度计预热30min以上,调节波长660nm,蒸馏水调零。
2、酶促反应(在EP管中加入下列试剂)

 对照管测定管
试剂一(μL6545
试剂二(μL4040
试剂三(μL2020
试剂四(μL 20
样品  μL 100
混匀,37(哺乳动物)或25(其他物种)准确水浴10min
试剂五(μL2525
样品 μL100 
混匀,4000g,常温离心10min,取上清液


3定磷(1.5mLEP管中依次加入下列试剂)

 空白管标准管对照管测定管
0.5μmol/ml标准磷应用液(μL 20  
上清液(μL  2020
蒸馏水(μL20   
定磷试剂(μL200200200200
混匀,40水浴10min,在 660nm处,记录各管吸光值。


三、计算
1、血清(浆)Na+K+-ATPase活力的计算:
定义:规定每小时每毫升血清(浆)中Na+K+- ATP 酶分解ATP 产生1μmol无机磷的量为一个酶活力单位。
Na+K+-ATP酶活力(U/mL= C标准管×A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)×V÷V÷T=7.5×A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)

2、组织、细菌或细胞中Na+K+- ATPase活力的计算:
1)按蛋白浓度计算:
定义:规定每小时每毫克组织蛋白中Na+K+- ATP 酶分解ATP 产生1μmol无机磷的量为一个酶活力单位。
Na+K+-ATP酶活力(U/ mg prot)= C标准管×A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)×V÷Cpr×V样)÷T =7.5×A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)÷Cpr
2)按样本鲜重计算:
定义:规定每小时每克组织中Na+K+-ATP 酶分解ATP 产生1μmol无机磷的量为一个酶活力单位。
Na+K+-ATP酶活力(U/g鲜重)= C标准管×A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)×V÷(V÷V样总×W)÷T=7.5×A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)÷W
3)按细菌或细胞总数计算:
定义:规定每小时每1万个细菌或细胞中Na+K+-ATP 酶分解ATP 产生1μmol无机磷的量为一个酶活力单位。
Na+K+-ATP酶活力(U/104cell)= C标准管×A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)×V÷(V÷V样总×500)÷T=0.015×A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)
C标准管:标准管浓度,0.5μmol/mLV总:酶促反应总体积,0.5mLV样:加入样本体积,0.2mL V样总:加入试剂一体积,1mLT:反应时间,1/6小时;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样本鲜重,g500:细菌或细胞总数,500万。

注意事项
1、由于每一个样都必须做对照,本试剂盒50管保证测 24Na+K+-ATP酶。
2、此法具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管要求严格无磷。
3、空白管和标准管只要做一管

相关文献:

《MicroRNA-98 reduces amyloid β-protein production and improves oxidative stress and mitochondrial dysfunction through the Notch signaling pathway via HEY2 in Alzheimer's disease mice》 作者:Fang?Zhou Chen, Ying Zhao, Hui?Zhao Chen 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影响因子:2.928 PMID:30365070
《Transcriptomic analysis reveals effects of fucoxanthin on intestinal glucose transport》 作者:Wanxiu Cao,Jing Li,Yaoxian Chin,Robert W.Li, Changhu Xue,Qingjuan Tang 期刊:Journal of Functional Foods 影响因子:3.197 PMID:

 

 

Na+k+ ——ATP酶活性检测试剂盒 微量法

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