品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | CAS | 无 |
---|---|---|---|
分子式 | 详询 | 纯度 | 详询 |
分子量 | 详询 | 货号 | BC0165 |
规格 | 100T/48S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)检测 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,综合 |
土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)活性检测试剂盒说明书
微量法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC0165
规格:100T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体5 mL×1瓶(自备) | 2-8℃保存 |
试剂二 | 粉剂×2瓶 | -20℃保存 |
试剂三 | 液体30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂四 | 液体20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
标准液 | 液体1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、恒温培养箱/水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、30~50目筛、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30~50目筛。
二、测定步骤
分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至400nm,分光光度计用蒸馏水调零。
用蒸馏水倍比稀释:50、25、12.5、6.25μmol/L。100、50、25、12.5、6.25μmol/L做标准液,可按下表稀释。
标准液浓度稀释表
序号 | 稀释前浓度(μmol/L) | 标准液体积(µL) | 蒸馏水体积(µL) | 稀释后浓度(μmol/L) |
1 | 1000 | 50 | 450 | 100 |
2 | 100 | 200 | 200 | 50 |
3 | 50 | 200 | 200 | 25 |
4 | 25 | 200 | 200 | 12.5 |
5 | 12.5 | 200 | 200 | 6.25 |
备注:试验中需标准液70µL。
加样表:
试剂名称 | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
风干土样(g) | 0.02 | 0.02 | - | - |
试剂一(μL) | 10 | 10 | - | - |
振荡混匀,使土样全部湿润,室温放置15min | ||||
试剂二(μL) | 130 | - | - | - |
试剂三(μL) | 160 | 160 | - | - |
混匀,37℃水浴/恒温培养箱1h后,立即沸水浴煮沸5min(盖紧缠封口膜,防止水分散失),流水冷却 | ||||
试剂二(μL) | - | 130 | - | - |
充分混匀,10000g常温离心10min,取上清液 | ||||
上清液(μL) | 70 | 70 | - | - |
标准液(μL) | - | - | 70 | - |
蒸馏水(μL) | - | - | - | 70 |
试剂四(μL) | 130 | 130 | 130 | 130 |
充分混匀,室温静置2min后,测定400nm处吸光值A,计算ΔA测定=A测定管-A对照管,ΔA标准=标准定管-A空白管。(每个测定管设一个对照管)
参考文献:
Dick W A, Thavamani B, Conley S, et al. Prediction of β-glucosidase and β-glucosaminidase activities, soil organic C, and amino sugar N in reflectance spectroscopy[J]. Soil Biology & Biochemistry, 2013, 56(9): 9e104.
Sestelo A B F, Poza M, Villa T G. β-Glucosidase activity in a Lactobacillus plantarum wine strain[J]. World Journal of Microbiology and Biotechnology, 2004, 20(6): 633.
相关系列产品:
BC0280/BC0285 土壤碱性磷酸酶(S-AKP/ALP)活性检测试剂盒
BC0110/BC0115 土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性检测试剂盒
BC4040/BC4045 土壤中性转化酶(S-NI)活性检测试剂盒
BC4030/BC4035 土壤β-1,4-葡聚糖酶活性检测试剂盒
BC4010/BC4015 土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)活性检测试剂盒
土壤β-葡萄糖苷酶活性检测试剂盒 微量法
土壤β-葡萄糖苷酶活性检测试剂盒 微量法